霉菌和酵母菌的计数检测是微生物学实验中常见的一项技术,用于评估样品中霉菌和酵母菌的数量。以下是对霉菌和酵母菌计数检测的详细介绍:
一、检测目的
霉菌和酵母菌计数检测的主要目的是了解样品中霉菌和酵母菌的污染程度,为食品安全、环境监测、药品质量控制等领域提供科学依据。
二、检测方法
霉菌和酵母菌的计数检测通常采用平板计数法,也可以使用显微镜直接镜检计数法或测试片计数法。
平板计数法
- 样品处理:对于固体样品,需要用灭菌刀或镊子从不同部位采取试验材料,再混合磨碎;对于液体或半固体样品,可用迅速颠倒容器多次来混匀。
- 样品稀释:为了减少稀释倍数的误差,在连续递增稀释时,每一稀释度应更换一根吸管。为了使霉菌的孢子充分散开,需用灭菌吸管反复吹吸多次。
- 培养基选择:常用的培养基有马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基(PDA)、孟加拉红(虎红)培养基和高盐察氏培养基等。这些培养基对霉菌和酵母菌的生长有良好的促进作用,同时能抑制细菌的生长。
- 倾注培养:每个样品应选择3个适宜的稀释度,每个稀释度倾注2个平皿。培养基熔化后冷却至适宜温度(如45℃或46℃),立即倾注并旋转混匀。培养基凝固后,把平皿翻过来放温箱培养,培养温度通常为2528℃,培养时间一般为35天。
- 菌落计数及报告:选取菌落数在10~150之间的平板进行计数。一个稀释度使用两个平板,取两个平板菌落数的平均值,乘以稀释倍数报告。固体检样以g为单位报告,液体检样以mL为单位报告。
显微镜直接镜检计数法
- 这种方法适用于对霉菌进行计数。在显微镜下观察视野中有无菌丝,符合一定条件(如一根菌丝长度超过视野直径1/6等)的视野为阳性视野。根据对所有视野的观察结果,计算阳性视野所占比例,并以阳性视野百分数(%)报告结果。
测试片计数法
- 测试片计数法是一种快速、简便的霉菌和酵母菌计数方法。它使用预先制备好培养基的测试片,将样品稀释液接种到测试片上,经过培养后观察并记录菌落数。
- 操作步骤包括样品处理、稀释、接种测试片、培养和判读等。结果计算时,选取菌落数在适宜范围内的测试片进行计数,平均菌落数乘以稀释倍数报告。
三、注意事项
- 在整个操作过程中,要注意无菌操作,避免污染。
- 计数时要准确、仔细,避免漏计或重计。
- 报告结果时要清晰、准确,符合相关标准。
- 选择合适的培养基和稀释度对于准确计数至关重要。
- 培养温度和时间的控制也是影响计数结果的重要因素。
综上所述,霉菌和酵母菌的计数检测是一项重要的微生物学实验技术。通过选择合适的检测方法、注意操作细节和准确报告结果,可以为相关领域提供科学、可靠的依据。
检测(报告)的用途
产品检测是反映产品各个指标达到标准的合格要求,能够为企业产品的研发、投标、电商平台的上架、商超入驻、学校科研等提供一个客观的参考。同时作为产品认证合格的一种体现。