森田等27批次面膜检测不合格，22批次菌落超标，

1946年，Hills报道了由于使用染有破伤风梭状芽孢杆菌的爽身粉导致数个新生儿死亡的病例，这是首次关于化妆品微生物污染的报道。

20世纪60年代后，陆续有研究者从化妆品中分离出机会性病原体。化妆品中微生物污染逐渐引起人们的重视。

近几年来，我国的化妆品销售量迅速增长，化妆品污染问题也逐渐浮出水面，

2009年郑萍等对北京市售化妆品进行微生物污染情况调查，结果显示化妆品总合格率为92.23%。

在我国，2007年修订的《化妆品卫生规范》是近几年来化妆品质量保证的重要依据。然而，在这些规定中微生物的检测方法主要是依赖传统的琼脂平板培养方法，该方法有诸多局限性如检测方法繁琐，需配制大量的固体和液体培养基（或选择性培养基），耗费时间长，样品需培养48或72

h才能观察结果，最终结果还需结合生化试验等方法进行综合判断，且容易出现误检和漏检。

另外，防腐剂的存在使相当一部分化妆品的抑菌作用无法清除，在很大程度上影响了化妆品的检验结果。但是百检生物检测为您了解到，有研究者基于以上问题提出了以下5种改进的方法，传统方法与改良方法的对比

1) 使用 SCDLP ( soya casein digest lecithin polysorbate broth) 培养液。

 

SCDLP 培养液是一种含有中和剂 ( 卵磷脂和吐温 80) 且有增菌作用的培养基。传统方法中只是对铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的检测采 用了 SCDLP 培养液，杨丽华等提出用 SCDLP 培养液代替生理盐水直接稀释样品检测菌落总数，并用 SCDLP 培养液代替乳糖胆盐对粪大肠菌群增菌，用卵磷脂 － 吐温 80 营养琼脂培养基分离，进行化妆品微生物学指标的检测，可简化微生物指标检测的操作步骤。 

 

 

2) 增加阳性对照组。

 

在传统检测方法中加入一定量的卵磷脂和吐温 80 可消除防腐剂的抑菌效果，但根据防腐剂的不同，清除的效果有限，为了更真实地反应化妆品微生物污染情况，可在检测时增加阳性对照 组，且以回收率达到 70% 作为检测方法有效性的评价标准。江志杰等建议在进行化妆品检验时， 做控制菌的阳性对照，如果阳性对照未生长，则应进行方法学验证。白雪梅建议在测定微生物总数时，设 置 2 个空白对照: 在做液化明胶试验时，设置液化明胶试验的阳性菌株和阴性菌株对照。 

3) 适当使用氯化三苯基四氮唑( TTC) 。

 

绝大多数细菌均含有脱氢酶，能使相应的底物脱氢，TTC 可作为受氢体，接受氢后还原成红色非溶解性物质。

 

为了区别化妆品中不溶解的颗粒与菌落，可在培养基中加入 TTC 溶液，但 TTC 也是抑菌剂，在一定浓度时可抑制细菌的生长繁殖，因此在使用 TTC 时不能随意地增加用量，以免用量过大而产生抑菌作用。覃洁建议应规范使用 TTC，以免影响微生物检验结果的准确性。

 

4) 使用滤膜法。

 

滤膜法又称薄膜过滤法，在含抑菌成分药品的微生物限度检查中应用相当广泛，但在化妆品领域应用甚少，其原理是适量样品通过微孔滤膜后，可去除样品中的抑菌杀菌成分，大多数细菌( 直径大于 0. 45 μm) 截留在滤膜上，用适量冲洗剂将抑菌杀菌成分冲洗掉，可使污染样品的细菌检测结果更加可靠。孙娜等和庞燕军等通过比较滤膜法和国标法在活菌检出率和阳性菌回收率上的不同，发现滤膜法操作简单，培养时间较短，且可有效去除化妆品中防腐剂的抑菌作用。

 

 

 

5) 使用螺旋平板法。

螺旋接种菌落计数是依据阿基米德螺旋原理，使样品以对数规律螺旋线形式接种在平板上，样品接种后，菌落即分布在螺旋轨迹上，随半径的增加分布得越来越稀，采用特殊的计数栅格， 自平板外周向中央对平皿上的菌落进行计数，即可得到样品中微生物的数量。

 

螺旋接种菌落计数法加样量精确，菌落分布均匀，且可以很大程度上减少或免除样本稀释过程，因此在国外食品药品的菌落计数实验中得到广泛应用。

 

陈彬等应用螺旋平板法和国标法分别对食品和化妆品进行菌落总数检测，结果显示螺旋平板法实现了一定程度上的自动化，大大提高了菌落计数的效率，可应用于实验室进行食品和化妆品日常检测以及菌悬液计数。 

 

传统微生物检测方法所需实验材料简单、价格便宜，但是操作繁琐、耗时长、防腐剂的存在影响检测结果的准确性，通过对传统方法进行改进，可有效提高检测效率，同时使结果更加真实可靠。